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產(chǎn)品名稱	人肺微血管內(nèi)皮細胞	產(chǎn)品規(guī)格	5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源	肺組織	生長特性	貼壁
細胞形態(tài)	內(nèi)皮細胞樣	分類	人原代細胞
貨號	A01X1253	用途	僅供科研實驗

培養(yǎng)信息：

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包被條件 PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

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人肺微血管內(nèi)皮細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的人肺微血管內(nèi)皮細胞采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的人肺微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、酵母和等。

培養(yǎng)方法與步驟：

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①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。

⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：

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1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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球蛋白結(jié)合蛋白(BIP)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框185抗體
球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒	鴨甲型肝炎病毒聚蛋白/鴨肝炎病毒抗體
球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框189抗體
球蛋白G3(IgG3)ELISA試劑盒	鴨肝炎病毒VP1抗體
球蛋白G1(IgG1)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框192抗體
球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒	鴨瘟病毒DPV抗體
球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框198抗體
球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒	雙特異性磷酸酶抗體11抗體
球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框201抗體
球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒	雙特異性磷酸酶抗體12抗體
球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框21抗體
球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒	雙特異性磷酸酶抗體13抗體
球蛋白E Fc段受體Ⅰ(FcεRⅠ)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框31抗體
球蛋白D(IgD)ELISA試劑盒	雙特異性磷酸酶抗體15抗體
球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒	人肺微血管內(nèi)皮細胞1號染色體開放閱讀框49抗體
球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒	雙特異性磷酸酶抗體16抗體
核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框50抗體
反應性生長(irGH)ELISA試劑盒	雙特異性磷酸酶抗體19抗體
錳超氧化物歧化酶(SOD2)ELISA試劑盒	1號染色體開放閱讀框51抗體